收貨處理取出T25細胞培養瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態
傳代密度細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養
傳代代數可傳5代左右;3代以內狀態最佳
傳代比例傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿
傳代方法
1.吸出T25細胞培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;
2.添加0.25%消化液1mL至T25培養瓶中,輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后,吸出多余消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml培養基終止消化;
3.用吸管輕輕吹打混勻,按1:2比例接種T25培養瓶傳代,然后補充新鮮的培養基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養;
4.待細胞貼壁后,培養觀察;之后每2-3天換液一次新鮮的培養基。
產品名稱 | 大鼠腹腔巨噬細胞 | 貨號 | EY-XY3570 |
英文名稱 | 詳見說明 | 規格 | 5x105cells/T25或1mL凍存管 |
質量檢測:細胞經CD68免疫熒光鑒定,純度高于 90%,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等
產品規格:5x105cells/T25或1mL凍存管
培養基:大鼠腹腔巨噬細胞專用培養基
培養條件:氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃
換液頻率:每2-3天換液一次
消化液:(12mM)
產品貨期現貨,1周左右
運輸方式T25培養瓶/ 順豐快遞(包郵)
供應限制僅限于科學研究,絕不可作為動物或人類疾病的治療產品使用
大鼠腹腔巨噬細胞采用反復往腹腔注射培養基并抽取的方法結合差速貼壁制備而來,大鼠腹腔巨噬細胞分離自腹腔;腹腔巨噬細胞分離自腹腔;腹腔,即軀干腹部的腔,內襯腹膜,由體壁、橫膈膜和盆底圍成,其內容納胃、肝、膽囊、脾臟、胰、腎臟、腸、闌尾、膀胱、泌尿系和婦科(子宮、附件)等其他內臟器官。巨噬細胞屬免疫細胞,有多種功能,是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學的重要對象。巨噬細胞較易獲得,便于培養,并可進行純化。巨噬細胞屬不繁殖細胞群,在條件適宜下可生活2-3周,多用做原代培養,難以長期生存。 |
1.準備:取各種已消毒的培養用品置于凈化臺面,紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2.布局:點燃酒精燈,安裝吸管帽。
3.處理組織:把組織塊置于燒杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如懷疑組織可能污染,可先置于含有青的混合液中30~60分鐘。
4.剪切:用眼科剪把組織切成2~3毫米大小的塊,以便于消化。加入比組織塊總量多30~50倍的液,然后一并倒入三角燒瓶中,結扎瓶口或塞以膠塞。
5.消化:或用恒溫水浴,或置于37℃溫箱消化均可,消化中每隔20分鐘應搖動一次,如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。
6.分離:在消化過程中見消化液發混濁時,可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察,如組織已分散成細胞團或單個細胞,立即終止消化,隨即通過適宜不銹鋼篩,濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速(500~1000轉/分)離心消化液5分鐘,吸出上清,加入適量含有血清的培養液。
7.計數:用計數板計數,如細胞懸液細胞密度過大,再補加培養液調整后,分裝入培養瓶中。對大多數細胞來說,pH要求在7.2~7.4范圍,培養液呈微紅色,如顏色偏黃,說明液體變酸,可用NaHCO3調整。
8.培養:置于36.5℃溫箱培養,如用CO2溫箱培養,瓶蓋需擰松半圈。
嗅覺受體52D1抗體
細胞磷酸腺苷脫氨酶(AMPD)活性比色法定量檢測試劑盒
基因甲基化特異性PCR擴增(MSP)試劑盒
腺病毒凍存培養基(動物實驗)
載玻片細胞ERK蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒
通用型牛副結核病(Johne’s disease或M. paratuberculosis)
體液低密度脂蛋白(LDL-Cholesterol)酶連續循環比色法定量檢測試劑盒
細胞氯乙酰轉移酶(CAT)活性熒光定量檢測試劑盒
精(ARG)氧化高效液相色譜 (HPLC)分析試劑盒
睪丸組織固著液(Bouin固著液)
細菌銅型亞鹽還原酶活性比色法定量檢測試劑盒
載玻片細胞AKT蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒
D-乳酸待測樣品處理試劑盒
大鼠αACTIN基因甲基化檢測試劑盒
組織CK2α激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)
DMEM培養液(無抗生素)
脂肪分解刺激脂蛋白受體抗體
高密度脂蛋白受體/清道夫受體重組兔單克隆抗體
人類乳頭狀瘤病毒18 E7抗體
LOC83459蛋白抗體
細胞生長抑制基因36蛋白抗體
γ連環蛋白/Catenin γ /γ鏈接素抗體
亮拉鏈蛋白抗體
大鼠腹腔巨噬細胞BRD3蛋白抗體
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